Candida albicans’ın Salgısal Asit Proteinaz Etkinliğinin Araştırılmasında In Vivo Model Olarak Galleria mellonella Larvanın Kullanılması
Ali Alvandian1, Mohamad Hasan Jawadi2, Zeynep Nur Altıntaş2, Naci Yıldız2, Meral Karaman11Dokuz Eylül Üniversitesi Tıp Fakültesi, Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, İzmir2Dokuz Eylül Üniversitesi Tıp Fakültesi, Dönem 2 Öğrenci Çalışma Modülü Grubu, İzmir
GİRİŞ ve AMAÇ: Enfeksiyon hastalıklarının patogenezinin araştırılmasında, fare-sıçan modelleri uzun yıllardır kullanılmaktadır. Tıbbi öneme sahip birçok mikroorganizmanın model konakçısı olarak Galleria mellonella larva kullanımı literatürde kabul görmüştür. Bu çalışmada, Candida albicans’ın salgısal asit proteinaz (SAP) enzim aktivitesinin, konakçı modeli olarak G. mellonella larva üzerindeki etkileri araştırılmıştır.
YÖNTEM ve GEREÇLER: Enfeksiyon modeli için, salgısal asit proteinaz (SAP) enzim aktivitesi sığır serum albümin agar yöntemi ile olumlu ve olumsuz olarak bulunan iki klinik C. albicans kökeni kullanıldı. Son larval evrede, 2-3 cm uzunluğunda, 250-300 mg ağırlığında, sağlıklı G. mellonella larvalar dört gruba ayrıldı; kontrol, “sham” (fosfat tampon), SAP olumlu ve SAP olumsuz (5x105 CFU/ml) C. albicans ile enfekte grup. İnokulasyon sonrası larvalar 37ºC’de bekletildi. Doksan altı saat sonra sağlık durumları skorlandı, sakrifiye edildi ve fungal yük araştırıldı.
BULGULAR: Larvalar aktivite, yaşamda kalma, melanizasyon ve fungal yük açısından değerlendirildiğinde gruplar arasında anlamlı bir farklılık olduğu saptandı. Kontrol ve “sham” gruplarında ölüm ve melanizasyon gözlenmezken, 96. saat sonunda patojen üremesi de saptanmadı. SAP olumlu ve olumsuz gruplar arasında fungal yük, melanizasyon ve toplam sağlık skoru açısından anlamlı farklılık bulundu (p<0.05).
TARTIŞMA ve SONUÇ: Çalışmamızda, C. albicans’ın SAP enzim aktivitesinin virülansta rol oynadığı G. mellonella larva modelinde gösterilmiştir. Fungal enfeksiyonların ve SAP gibi virülans faktörlerinin konak hücreye etkilerinin araştırılmasında G. mellonella larva modelinin güvenilir, uygulaması kolay ve ucuz bir model olarak kullanılabileceğini göstermektedir. Larva modelinin, memeli modellerine alternatif olarak yaygınlaşması etik kaygıların azalmasına da katkıda bulunacaktır.
Using Galleria mellonella Larvae as the in Vivo Model in Investigating the Secretory Acid Proteinase Activity of Candida albicans
Ali Alvandian1, Mohamad Hasan Jawadi2, Zeynep Nur Altıntaş2, Naci Yıldız2, Meral Karaman11Dokuz Eylül University Faculty of Medicine, Department of Medical Microbiology, Izmir2Dokuz Eylül University Faculty of Medicine, Semester 2 Student Working Group, Izmir
INTRODUCTION: Mouse-rat models have been used for many years in studying the pathogenesis of infectious diseases. Using Galleria mellonella larvae was accepted in the literature as a model host for many microorganisms that are important for medical reseach. In this study, the secretory acid proteinase (SAP) enzyme activity of Candida albicans was investigated on the G. mellonella larvae as a model host.
METHODS: Two clinical C. albicans strains were used for the infection model, which had positive and negative SAP enzyme activity determined by bovine serum albumin agar method. Healthy G. mellonella larvae of 2-3 cm length and 250-300 mg weight in the last larval stage, were divided into four groups; control, sham (phosphate buffer), SAP positive and SAP negative (105 CFU/ml) C. albicans-infected group. Larvae were left at 37ºC. Their health conditions were scored after 96 hours and they were sacrificed. Fungal burden was studied.
RESULTS: A significant difference was found between the groups when evaluated in terms of activity, survival, melanization and fungal load of larvae. The control and sham groups showed no death and melanization, no pathogen growth was detected at the end of 96 hours. Fungal burden, melanization and total health score showed significant difference between the SAP positive and SAP negative groups (p<0.05).
DISCUSSION AND CONCLUSION: In our study, the role of the SAP enzyme activity of C. albicans on the virulence was demonstrated in G. mellonella larvae in vivo model. G. mellonella larvae model can be used as a reliable, easily applicable and an inexpensive method in investigating the effects of fungal infections and virulence factors such as SAP on host cells. Widespread use of the larvae model as an alternative to mammalian models will also contribute to reducing ethical concerns.
Sorumlu Yazar: Meral Karaman, Türkiye
| ARAÇLAR |
 Tam Metin PDF Yazdır Alıntıyı İndir RIS EndNote BibTex Medlars Procite Reference Manager E-Postala Paylaş Yazara e-posta gönder
Benzer makaleler Google Scholar |